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蔗糖是由葡萄糖和果糖通過(guò)異構(gòu)體羥基縮合而成的非還原性二糖。蔗糖極易溶于水其溶解度隨著溫度的升高而增大。蔗糖的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，多呈無(wú)定型結(jié)構(gòu)，對(duì)阻止蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)改變、凍干處理過(guò)程中，貯藏期內(nèi)蛋白質(zhì)的伸展和聚集起重要的作用。糖對(duì)蛋白質(zhì)保護(hù)作用大小有時(shí)和其濃度有關(guān)，通常在某個(gè)濃度范圍內(nèi)糖的保護(hù)作用隨著濃度的升高而增大；當(dāng)達(dá)到某一濃度時(shí)保護(hù)作用達(dá)到大值，而此后再增大糖的濃度則保護(hù)效果不再顯著增加，有時(shí)反而會(huì)降低。在凍干時(shí)，其中蔗糖海藻糖等雙糖對(duì)一些蛋白質(zhì)均能顯示出良好的保護(hù)作用，具備...
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海藻糖又稱漏蘆糖、蕈糖等，是一種通過(guò)生物發(fā)酵技術(shù)從玉米、木薯等淀粉獲得的安全、可靠的天然糖類。海藻糖在食品以及醫(yī)藥生物制品方面等廣泛應(yīng)用。海藻糖是怎么應(yīng)用的呢？在食品中作為添加劑來(lái)改善干燥食品的質(zhì)量和風(fēng)味。在醫(yī)藥生物制品方面海藻糖因其具有高玻璃化轉(zhuǎn)變溫度和低吸濕性等特性，對(duì)實(shí)現(xiàn)蛋白等生物藥品的玻璃化凍結(jié)起重要作用，既是有效的低溫保護(hù)劑又是很好的凍干保護(hù)劑。海藻糖作為熒光PCR凍干保護(hù)劑的其中一種，在凍干中的應(yīng)用：既能在冷凍過(guò)程中充當(dāng)?shù)蜏乇Ｗo(hù)劑，又能在干燥脫水過(guò)程中起到脫水保護(hù)...
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普及一下熒光定量PCR的幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：1、使用特異性探針對(duì)定量分子進(jìn)行識(shí)別，具有很高的準(zhǔn)確性。同時(shí)靶序列由引物和探針雙重控制，特異性好、假陽(yáng)性低。2、熒光PCR檢測(cè)技術(shù)是綜合了PCR技術(shù)、熒光標(biāo)記技術(shù)、激光技術(shù)、數(shù)碼顯象技術(shù)為一體的技術(shù)，因此檢測(cè)靈敏度高。3、熒光信號(hào)的產(chǎn)生和每次擴(kuò)增產(chǎn)物成一一對(duì)應(yīng)的關(guān)系，通過(guò)熒光信號(hào)的檢測(cè)可以直接對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行定量；定量范圍可在0－1010拷貝/毫升。4、擴(kuò)增和檢測(cè)可以在同一管內(nèi)檢測(cè)，一步完成，不需要開(kāi)蓋，不易污染。5、速度快、高通量，可在2－3小時(shí)...
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叔丁醇被大家認(rèn)為是適合制劑的凍干溶劑。有如下特點(diǎn)：凝固點(diǎn)高，純的叔丁醇在室溫下（25℃）就可以凍結(jié)。叔丁醇的蒸汽壓較高有利于升華，節(jié)省凍干時(shí)間。叔丁醇毒性低，在凍干過(guò)程中，大部分叔丁醇可在一次干燥階段升華，在制劑中殘留量很低。叔丁醇自身在凍結(jié)中形成針狀結(jié)晶，能改變?nèi)苜|(zhì)的結(jié)晶方式，利于升華。叔丁醇也可在熒光PCR試劑當(dāng)凍干保護(hù)劑使用。叔丁醇起到加快凍干進(jìn)程和改善凍干微觀結(jié)構(gòu)的作用。凍干前的熒光PCR反應(yīng)混合物原液中的濃度范圍為：叔丁醇的濃度為10%-40%（v/v）。熒光PCR...
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熒光PCR凍干體系篩選范圍:糖類、醇類、氨基酸類、聚合物類、大分子蛋白、無(wú)機(jī)鹽類等，其組分為其中的幾種的組合。優(yōu)化方法：沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)采用單一因素法，有一定經(jīng)驗(yàn)的采用多因素法。單一因素法篩選出保護(hù)效果比較好的保護(hù)劑，再將保護(hù)效果好的保護(hù)劑進(jìn)行組合，產(chǎn)生終配方。因此，初步篩選采用單因素法，進(jìn)一步篩選采用多因素法。我們不但能提供適合熒光PCR凍干的試劑凍干機(jī)Pilot10-15T，還能為用戶提供對(duì)藥品、診斷試劑、蛋白、多肽、酶、抗體、抗原等進(jìn)行凍干工藝優(yōu)化，包括保護(hù)劑優(yōu)化、凍干曲線優(yōu)化...
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實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，成為核酸分子定量的標(biāo)準(zhǔn)方法。在做熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)建議使用這些耗材：96孔光學(xué)反應(yīng)板配合光學(xué)膜，0.2ml光學(xué)八聯(lián)反應(yīng)管配合光學(xué)膜，0.2ml光學(xué)八聯(lián)反應(yīng)管配合平蓋的光學(xué)八聯(lián)管蓋等。在做熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)有一些好的方法分享給大家，例如在使用單管或者8連管做實(shí)驗(yàn)時(shí)，如果在樣本數(shù)量不多的時(shí)候，建議在樣品加熱塊（TRAY）上對(duì)稱的安放樣品，并且先放在第6列或者第7列...
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實(shí)時(shí)定量PCR不僅操作簡(jiǎn)便、快速高效，而且具有很高的敏感性和特異性。廣泛地運(yùn)用于分子生物學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。實(shí)時(shí)定量PCR在應(yīng)用中有一些使用人對(duì)定量的方法上覺(jué)得存在著不容易克服的問(wèn)題主要包括1.定量的方法與眾多因素有關(guān)，如水、緩沖液、儀器性能等，乃至于核酸的抽提過(guò)程都會(huì)影響到結(jié)果的穩(wěn)定性。2.標(biāo)準(zhǔn)品的穩(wěn)定保存很難獲得成功，高濃度的核酸物質(zhì)易于被降解，而每次配制新的標(biāo)準(zhǔn)品又會(huì)增加批間差異。3.每次測(cè)定樣本都要同時(shí)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品，而熱循環(huán)儀的樣本孔有限，所以在單批內(nèi)不能測(cè)定更多的樣本，這樣...
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凍干熒光PCR試劑凍干方法是將熒光PCR試劑經(jīng)過(guò)預(yù)凍，在真空狀態(tài)下進(jìn)行升華，后可制備成凍干粉。凍干熒光PCR試劑時(shí)，選用的反應(yīng)管在做凍干時(shí)有許多不足之處：1.由于反應(yīng)管呈上寬下窄的錐字形，還需要借助其他工具支撐，這樣反應(yīng)管試劑與凍干機(jī)擱板的接觸面積很小，升華時(shí)傳熱會(huì)受到限制，延長(zhǎng)了預(yù)凍和升華的時(shí)間，反應(yīng)管中的凍干程序一般在24～30小時(shí)，凍干制品日產(chǎn)量很低。2.反應(yīng)管中的凍干，在加入凍干混合試劑后，需要進(jìn)行離心處理，排出氣泡，并將粘附在反應(yīng)管壁上的試劑離心下來(lái)。3.反應(yīng)管中的...
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